Товарів: 0
На суму: 0 грн
М. Г. Бежуашвілі, гл. науковий співробітник відділу виноробства та біохімії,
Н.Г. Вепхішвілі, докторант,
Кобаїдзе Т.Д., старший науковий співробітник відділу виноробства та біохімії
Інститут садівництва, виноградарства і виноробства Грузії
ІДЕНТИФІКАЦІЯ ТА ВИЗНАЧЕННЯ БІОЛОГІЧНО АКТИВНОГО ε-ВІНІФІРИНУ У ВИНОГРАДІ ТА ВИНОМАРТЕРІАЛАХ СОРТІВ САПЕРАВІ ТА КАБЕРНЕ СОВІНЬОН
Досліджено шкірку винограду червоних технічних сортів, поширених у східній Грузії, — Сапераві та Каберне Совіньон; а також самоосвітлені виноматеріали, приготовлені з цих сортів для сухих столових вин. Фракції, що містять стильбен, були виділені з шкурок і виноматеріалів, і в них ідентифіковано димер ресвератролу ε-вініферин на основі різних характерних даних, що порівнюють окремі ε-вініферини. Концентрацію ε-вініферину визначали методом ВЕРХ; у виноматеріалі Сапераві – 0,98 мг/л, Каберне Совіньон – 0,40 мг/л. Результати є теоретичною основою для подальших досліджень біологічної активності, лікувальної та поживної цінності грузинських червоних вин.
З виявленням «французького парадоксу» вивчення лікувальних і поживних властивостей червоних вин стало актуальним питанням для багатьох вчених, і наразі функціональність червоних вин підтверджена численними експериментами [1-7]. Користь червоних вин для здоров’я людини в основному зумовлена вмістом у них фенольних речовин, які характеризуються високою біологічною активністю [8-12]. Фенольний комплекс червоних сортів винограду і вин представлений багатим спектром антоціанів, проантоціанів, флавонолів, катехінів, фенолокислот, стильбенів [13-15]. Серед них важливе місце займають сполуки стильбенових груп, які мають високу біологічну активність і відіграють значну роль у формуванні лікувальних і поживних властивостей червоних вин. Мономерний стильбен-ресвератрол в червоних винах представлений у вигляді транс- і цис-ізомерних форм, а також відповідних їм глюкозидів - піцеїдів. Це підтверджено дослідженнями червоних і рожевих вин у різних країнах [16-20].
Ресвератрол характеризується різною біологічною активністю. Для виноградної лози це фітоалексин [21]; має: антиоксидантні, антиканцерогенні, антибактеріальні, антиагрегантні, антиатеросклеротичні властивості, лікувально-профілактичну дію при захворюваннях серцево-судинної системи [22-26].
У червоних винах виявлено похідні ресвератролу: зокрема, його димерні форми у вигляді дельта- та ε-вініферину, тримерного α-вініферину та тетрамерного ресвератролу. Серед представників стильбенових груп червоні вина також містять паллідол, астрінгін, піцеатаанол [27-30]. Бразильське червоне вино сорту Мерло містить дельта-вініферин у кількості 10 мг/л [31]. Південноафриканські червоні вина містять транс-ε-вініферин у таких кількостях (мг/л): Мерло 1,2; Каберне Совіньон - 0,69; Ксар - 0,49; Амджад - 0,2; Не зафіксовано у винах із сортів Мускат, Сіді-Брахім, Терраль, Герруан, Грі д’Алжир [32].
Численні дані свідчать про біологічну активність вініферину: природний вініферин має протизапальні властивості за рахунок інгібування ФДЕ4 [33]; (+)-вініферин, виділений із Sophora mooracroftiana, має інгібуючу дію на окиснення ліпідів супероксид-аніоном [34]. Вініферин, ресвератрол і поліфенол, виділені з пагонів виноградної лози, мають окислювальну та апоптотичну дію на лімфоциди хронічної лейкемії [35]. Вініферин, виділений із червоного вина, мав сильніший інгібуючий ефект на мікросоми печінки людини порівняно з ресвератролом [36]. Антиоксидантну активність транс-ε-вініферину, виділеного з виноградної лози, було підтверджено шляхом порівняння ресвератролу та синтетичних 4-гідроксистильбену, 4,4-дигідроксистильбену, 3,5-дигідроксистильбену та триметилресвератролу [37]; ε-вініферин – фітоалексин [38, 39]; Виявлено інгібуючу дію ε-вініферину на цитохром Р450 [40].
Вивчення вмісту стильбенів у винограді та вині ми розпочали в 1991 році з ідентифікації транс-ресвератролу в однорічних пагонах (обрізках) виноградної лози [41]. Продовжуючи цю роботу, також були ідентифіковані ε-вініферин і 2 тетрамери ресвератролу [42, 43]. Транс-ресвератрол виявлено в шкірці червоних технічних сортів винограду та винах з цих сортів: Сапераві, Каберне Совіньйон, Оцханурі Сапере і Тавквері [44, 45]. Встановлено динаміку накопичення транс-ресвератролу під час приготування червоних вин.
Виявлено стимулюючу дію транс-ресвератролу на винні дріжджі під час спиртового бродіння [46] та антагоністичну дію на мікроорганізми Agr.tumefaciens, які викликають рак виноградної лози [47]. Експерименти in vitro визначили антиоксидантну активність транс-ресвератролу, ε-вініферину та тетрамерних стильбенів як інгібіторів утворення малонового діальдегіду в сироватці крові людини [48].
Продовжуючи дослідження стильбенових речовин у грузинських червоних винах у зв'язку з їх біологічною активністю та лікувально-поживними властивостями, ми поставили перед собою завдання ідентифікувати та визначити ε-вініферин у винограді та винах червоних технічних сортів Сапераві та Каберне Совіньйон та винах з цих сортів.
Об’єктами дослідження були: шкірка винограду червоних технічних сортів Сапераві та Каберне Совіньон; виноматеріали самоосвітлені для приготування столових сухих червоних вин, одержані із зазначених вище сортів. Зразки були взяті в Кахетії (східна Грузія) з урожаю 2008 року.
Стільбеновмісні сумарні препарати з шкур і виноматеріалів отримували екстракцією їх етилацетатом. Подрібнену та висушену на повітрі шкірку повністю екстрагували етилацетатом шляхом поетапної екстракції (кожна тривалістю 30 хвилин) у гарячих умовах. Фракції етилацетату об’єднували та концентрували на роторному випарнику для отримання загального досліджуваного екстракту.
Виноматеріали в кількості 1,0 л згущували на роторному випарнику до 200 мл, потім переносили в ділильну лійку і екстрагували 3 рази етилацетатом при кімнатній температурі. Фракції етилацетату об'єднували та концентрували для отримання загального досліджуваного екстракту.
Для виділення стильбеновмісних сумарних препаратів отримані екстракти фракціонували методом колонкової хроматографії на адсорбенті Sephadex G-22, елююючи сумішшю розчинників метанол: вода (3:2) [27]. Елюат концентрували на роторному випарнику і досліджували.
Якісний аналіз стильбенвмісного сумарного препарату проводили методом тонкошарової хроматографії на силюфолових пластинах (20 см х 20 см) у системі розчинників хлороформ:метанол (80:20). Хроматограми переглядали як під ультрафіолетовим опроміненням, так і проявляли діазотованою сульфаніловою кислотою. Індивідуальний ε-вініферин (індикатор для контролю) виділяли з однорічних пагонів (обрізків) виноградної лози; індивідуальні ε-вініферини з досліджуваних зразків виділяли методом препаративної хроматографії та записували їх ультрафіолетовий та інфрачервоний спектри.
Високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ). Визначення ε-вініферину проводили в центральній лабораторії нашого інституту за таких умов: високоефективний рідинний хроматограф фірми Varian; акустичний модуль - Prostar 500; переносний модуль розчинника - Prostar 210; детектор - ультрафіолетовий/видимий спектр - Uv/Vis спектрометр Prostar 325; колонка - Microsorb 100 C 18; 250x4,6 Lxld (мм); 17:00 - розмір частинок; градієнтні умови: розчинник А - 0,025% водний розчин TFA (трифтороцтової кислоти); розчинник B-ACN/A, 80/20 (об./об.);
0-35 хв 20-50% В;
Рис. Тонкошарова хроматограма досліджуваних стильбенвмісних фракцій: 1 - а - індивідуальний ε-вініферин; 2 - стильбенвмісна фракція шкірки винограду Сапераві; 3 - стильбенвмісна фракція виноматеріалу Сапераві; 4 - стильбеновмісна фракція шкірки винограду Каберне Совіньон; 5 - стильбеновмісна фракція виноматеріалу Каберне Совіньон; б - транс-ресвератрол.
35 - 40 хв 50-100% Б;
41 - 46 хв 100% Б;
46 - 48 хв 100-20% Б;
48 - 53 хв 20% Б.
Швидкість потоку елюенту - 1 мл/хв; ін'єкції - 20 пл; при кімнатній температурі, на довжині хвилі 306 нм. Режим градієнта вибирали відповідно до літератури [32].
У стильбеновмісних сумарних фракціях, отриманих з виноградної шкірки і сухих червоних столових вин, виявлено ряд речовин. Серед них чітко виділяється досліджуваний е-вініферин (рис.). Збіг індивідуального ε-вініферину з аналогічною речовиною в досліджуваних стильбеновмісних сумарних фракціях підтверджено з Rf-0,47; фарбування плям при прояві ТШХ діазотованою сульфаніловою кислотою; однакове світіння під ультрафіолетовим опроміненням; аналогічні УФ та ІЧ спектральні дані; а також подібні піки щодо часу відновлення з ВЕРХ. Після ідентифікації ε-вініферину в шкірці винограду та вина визначали його концентрацію методом ВЕРХ (табл.).
Згідно з отриманими даними вміст ε-вініферину у винограді та виноматеріалах сорту Сапераві переважає за концентрацією порівняно з виділеним із винограду та вина Каберне Совіньйон.
Таблиця
Вміст ε-вініферину у виноградній шкірці та виноматеріалах
Сорти винограду | У шкірі, мг/100 г | У виноматеріалах, мг/л |
Сапераві | 0,74 | 0,98 |
Каберне Совіньон | 0,39 | 0,40 |
Так, у результаті експерименту, продовжуючи дослідження стильбенових речовин у червоних сортах винограду та виготовлених з них виноматеріалах, досліджено сорти Сапераві та Каберне Совіньон. Серед їхніх багатих фенольних спектрів у шкірці та самоочисних виноматеріалах було ідентифіковано та кількісно визначено ε-вініферин. Разом із ресвератролом, який ми ідентифікували, визначення ε-вініферину є важливою теоретичною основою для вивчення біологічної активності та лікувальної та поживної цінності грузинських червоних вин.
Автори висловлюють подяку зав. центральної лабораторії Л. Шубладзе та інженера-хіміка приладового аналізу Т. Сіхарулідзе для проведення ВЕРХ.
СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ
Ще почитати:
Міжнародні відносини о найменуванні шампанського та хереса
В чому різниця між шампанським, просеко та ігристим вином?
Отримання червоних ігристих вин пляшковим способом з винограду перспективних сортів
Ігристі вина
Токайські вина
У нашому блозі «Приватна Марка» багато цікавого контенту: новинки ринку виноробства, крафтові рецепти наших технологів, влоги на різні теми. Дистиляція, крафтові винокурні, виробництво крафтового сидру, крафтовий квас, рецептура сидру, виробництво крафтових напоїв за нашими рецептами, виробництво спирту в промислових масштабах. Це та багато іншого цікавого у блозі «Приватна Марка Україна» та мережі магазинів «Винороб».
Наприклад, ви вирішили відкрити сироварню, ковбасний цех або почати пекти крафтовий хліб — welcome! Ми завжди допоможемо: надамо рецептуру, забезпечимо всі витратні матеріали, відправимо нашого технолога, складемо технологічну карту, встановимо все обладнання, сертифікуємо виробництво, відкриємо для вас завод з нуля, виноробні, цехи, виноградники, налагодимо готовий продукт із виходом на ринок. Ми — компанія повного циклу: маємо багато представництв по всьому світу. Потрібна склотара, склобанки, медичний посуд, лабораторний посуд чи лабораторне обладнання — звертайтеся! У наших складах понад 900 тис. найменувань товарів та обладнання. Звертайтеся, не вагайтеся! Не важливо, де ви знаходитесь — у СНД, Європі, Америці чи Азії: ми маємо великий досвід. Privatna Marka йде в ногу з технологіями та інноваціями. Ми 20 років на ринку та відправили понад 1 млн посилок своїм клієнтам. Втілили багато креативних проєктів. Відкрили низку підприємств харчової промисловості, а також у непродовольчій та продовольчій групах технічних виробів. Втілили 147 комерційних проєктів у країнах СНД. Виробляємо 70 видів продукції власного виробництва в Україні, Німеччині та Китаї. У блозі ще більше цікавого та корисного.
Консультації за тел. +380 (67) 440-70-90
https://privatnamarka.com/
https://www.instagram.com/privatnamarka?igsh=MWt0NzNxbHJrbXh4ZQ==\
https://www.facebook.com/Privatnamarka
https://youtube.com/@privatnamarkacom?si=P5RH_spetEP3x_RQ\