Методи фізіолого-біохімічних досліджень - Методика діагностики морозостійкості сортів і саджанців

Як для господарських потреб, так і для селекційних цілей найважливішим завданням є оцінка існуючих і особливо селекційних сортів за їх морозостійкістю.
Одним із фізіолого-біохімічних показників, що корелюють із морозостійкістю, є стан води в тканинах рослин та їх вологоутримуюча здатність. Від співвідношення вільної і зв'язаної води в тканинах рослин залежить перебіг у них різноманітних фізіологічних процесів і стійкість рослин до несприятливих умов.
Під вільною водою умовно виділяємо кількість води, яку забирає сахароза в концентрації 60% при певній експозиції під зв'язаною водою - вода, що залишилася в тканинах після взаємодії з розчином сахарози (60%).
При визначенні водоутримуючої здатності шляхом сушіння враховується кількість води, втраченої за відомий час.
При визначенні вільної і зв'язаної води рефрактометричним методом враховують кількість води, видалену за певний час розчином сахарози відомої концентрації.
Отже, всі ці визначення безпосередньо враховують кількість води, яка тим чи іншим чином забирається.

Відбір проб і підготовка матеріалу.

Якщо досліджують листковий апарат, то зразки листків беруть із сьомого-дев'ятого вузла плодоносних крайніх пагонів на пагоні. У лабораторії з листової пластинки видаляють основні жилки, після чого листя подрібнюють ножицями.
На пагонах визначення проводять у лубі та деревині. Для цього беруть крайній пагін на стрілку, з якого нарізають живці від четвертого до шостого міжвузля. Кору знімають ножем, а луб і деревину зішкрібають до серцевини. Цю масу дрібно подрібнюють ножицями, від середньої проби відбирають і переносять у скляні пляшки.
Визначення фракцій води або, як їх ще називають, форм води, проводять рефрактометричним методом, дією гіпертонічного розчину сахарози за принципом, запропонованим А.В. Думанський. Використовують 60% розчин сахарози. Визначення проводять при температурі 20 С.
Заздалегідь підготуйте скляні пляшки з притертою пробкою. Пляшки зважують, а потім у кожну мікропіпеткою відмірюють 3 мл розчину сахарози. Після чого пляшки знову зважують, щоб визначити точну кількість розчину, що міститься в них. (Цього зважування можна уникнути, якщо роботу проводить один дослідник, точно дозуючи кількість сахарози. Враховують середню пробу 10-20 зважувань 3 мл сахарози). Після цього в кожну пляшку з розчином поміщають по 0,2 г (відважених на аналітичних вагах) досліджуваної подрібненої рослинної сировини і ставлять у темне місце на 3 години. При цьому без зважування ставлять ваги з розчином цукру, за вмістом яких визначають процентний вміст сахарози в розчині цукру (перед дослідом). Спеціальне дослідження встановило, що за цей час із зразка рослинного матеріалу виходить майже вся вода, яку можна забрати.
відсотковий розчин сахарози. До кінця цього періоду вихід води настільки сповільнюється, що практично не впливає на результати визначення. За допомогою рефрактометра РЛ-2 визначають кінцеву концентрацію розчину в кожному флаконі.
Одночасно визначають загальний вміст води в одній і тій же пробі (0,2 г) рослинної сировини, висушеної до постійної маси в сушильній шафі при 100-105 С і розміщеної в пляшки.
Розрахунок загальної кількості води.
D - маса вологої проби - 0,2 г,
В1 - вага з вологою пробою - 21,9161 г,
Bl - вага з сухою пробою - 21,8272 г-.
Загальна кількість води у відсотках від вологої ваги зразка

Розрахунок кількості вільної води.
А - процентний вміст сахарози в розчині цукру (до досліду) - 60%,
Б - відсоток сахарози в дослідному розчині (після досліду) - 38,6%,
Б - маса порожньої скляної пляшки - 33,8035 г,
G - маса флакона з розчином - 37,4817 г,
D - маса вологої проби - 0,2 г.

  • Маса 3 мл вихідного розчину сахарози (С) дорівнює:
  • G-V-C - 37,4817 - 33,8035 - 3,6782 g.

  • Знаходять масу сахарози у вихідному розчині (Е).
  • Дек дослідного розчину (х) визначають за процентним вмістом і масою цукру в ньому.
  • Відсоток цукру визначають за допомогою рефрактометра; маса цукру залишається незмінною (такою ж, що й у вихідному розчині). Отже:

  • Збільшення ваги дослідного (у) порівняно з масою вихідного дорівнює кількості відібраної води;
  • Кількість вільної води, що виділяється ( ) у відсотках від сирої ваги, знаходимо:
  • Кількість зв'язаної води визначається різницею між загальним вмістом води та вмістом вільної води
  • - 12,3 - 32,1%.
  • Дослідженнями встановлено, що співвідношення форм води в річному циклі розвитку рослини винограду істотно змінюється (табл. 1).
    Для діагностики морозостійкості сходів Віва від граду та встановлення ступеня морозостійкості різних сортів найбільш підходящим періодом для аналізу є зимові місяці. У літні місяці різниця у співвідношенні водних форм між різними сортами не така значна.


    Визначення водоутримуючої здатності. Вранці о певній годині відбирають листки з сьомого-дев'ятого вузла крайніх плодоносних пагонів на стрілку в кількості 3-5 штук на кожну повторність. Відібрані проби зважують на технохімічних вагах для визначення сирої маси листя. Після зважування листя розкладають на фільтрувальному папері в приміщенні з постійною температурою і вологістю. Подальші зважування проводять за такою схемою: 4 год.
    6 годин, 24 години ~ Після цього листя сушать у ємностях при температурі 100-105 С до постійної маси (зважування в цьому випадку проводять на аналітичних вагах). Потім розраховується вміст води у свіжій пробі та після висушування. Вміст води в свіжих зразках приймається за 100%, а після різних періодів сушіння виражається у відсотках від початкового вмісту.
    Ваговий метод призначений для визначення водоутримуючої здатності листя, але ми застосували його для досліджень зрілої лози. Для цього відбирають 1 г лубу та деревини і поміщають у попередньо зважені відкриті пляшки. Зважування та визначення проводять за схемою, наведеною вище.
    Аналіз результатів. Для встановлення певної закономірності досліджуваних показників роботу проводили на сортах-індикаторах у динаміці річного циклу розвитку рослини винограду. Результати трирічних досліджень показують, що важливіше не абсолютна кількість зв'язаної і вільної води, а їх співвідношення. Вивчаючи цей показник, встановлено, що, як правило, співвідношення зв’язаної води до вільної у морозостійких сортів вище, ніж у неморозостійких. Особливо ця кореляція помітна взимку (табл. 1),
    Виходячи з наведених даних про стан води в однорічних пагонах, можна припустити, що морозостійкі сорти в осінні місяці, істотно зв’язуючи воду, знижують активність води в колоїдній системі, визначаючи тим самим стійкість. Вже в жовтні за співвідношенням зв'язаної води до вільної можна виділити сорти з різним ступенем стійкості.
    Переконавшись, що співвідношення форм води в однорічних пагонах індикаторних сортів винограду корелює з морозостійкістю, ми провели серію аналізів сіянців, отриманих від схрещувань, з метою відбору морозостійких сортів. Високий відношення зв’язаної до вільної води в проростках відповідає більшому відсотку збережених бруньок (табл. 2).
    Найбільша вологоутримуюча здатність тканин спостерігалася в осінньо-зимовий період. Причому, чим більш морозостійкий сорт, тим сильніше виражена його вологоутримуюча здатність, тобто тим менше змінюється концентрація цукрового розчину.
    Морозостійкі сорти і сіянці характеризуються більш високим рівнем вологоутримуючої здатності, визначеної ваговим методом. Так, вологоутримуюча здатність листків (водовміст після 24-годинного сушіння) у серпні становила: Альфа – 49 %, Рислінг – 48 %, Тербаш – 44 %, Хусейн – 38 %, Німранг – 31 %; в лютому - Тайга Смарагд - 29%, Альфа - 29%, Німранг - 16%, 41-51-43 (Німранг х В.Рlmurensk 28%, 8-51-22 (Шасла біла) - 17%.

    Форми води, їх співвідношення та відсоток збереження вічок сіянців гібридів після зимових морозів.

    продовження

    Для з’ясування питання, чи є співвідношення водних форм корелюючим показником для інших видів рослин, ми провели серію аналізів на різних видах рослин, що відрізняються ступенем морозостійкості.
    Так, у лютому для лимона Вілла Франка встановлено мінімальний рівень співвідношення водних форм у пагонах.
    ~2,4; максимальний рівень
    Лимон Ічангенсіс (
    4,6; горобина - 9,2.
    З результатів експерименту випливає, що співвідношення форм води в тканинах та їх водоутримуюча здатність є показниками, які корелюють з морозостійкістю і тому можуть бути використані в селекції для масової діагностики сортів і саджанців на морозостійкість.



























    Ще почитати:

    Міжнародні відносини о найменуванні шампанського та хереса

    В чому різниця між шампанським, просеко та ігристим вином?

    Отримання червоних ігристих вин пляшковим способом з винограду перспективних сортів

    Ігристі вина

    Токайські вина

    У нашому блозі «Приватна Марка» багато цікавого контенту: новинки ринку виноробства, крафтові рецепти наших технологів, влоги на різні теми. Дистиляція, крафтові винокурні, виробництво крафтового сидру, крафтовий квас, рецептура сидру, виробництво крафтових напоїв за нашими рецептами, виробництво спирту в промислових масштабах. Це та багато іншого цікавого у блозі «Приватна Марка Україна» та мережі магазинів «Винороб».

    Наприклад, ви вирішили відкрити сироварню, ковбасний цех або почати пекти крафтовий хліб — welcome! Ми завжди допоможемо: надамо рецептуру, забезпечимо всі витратні матеріали, відправимо нашого технолога, складемо технологічну карту, встановимо все обладнання, сертифікуємо виробництво, відкриємо для вас завод з нуля, виноробні, цехи, виноградники, налагодимо готовий продукт із виходом на ринок. Ми — компанія повного циклу: маємо багато представництв по всьому світу. Потрібна склотара, склобанки, медичний посуд, лабораторний посуд чи лабораторне обладнання — звертайтеся! У наших складах понад 900 тис. найменувань товарів та обладнання. Звертайтеся, не вагайтеся! Не важливо, де ви знаходитесь — у СНД, Європі, Америці чи Азії: ми маємо великий досвід. Privatna Marka йде в ногу з технологіями та інноваціями. Ми 20 років на ринку та відправили понад 1 млн посилок своїм клієнтам. Втілили багато креативних проєктів. Відкрили низку підприємств харчової промисловості, а також у непродовольчій та продовольчій групах технічних виробів. Втілили 147 комерційних проєктів у країнах СНД. Виробляємо 70 видів продукції власного виробництва в Україні, Німеччині та Китаї. У блозі ще більше цікавого та корисного.

    Консультації за тел. +380 (67) 440-70-90
    https://privatnamarka.com/
    https://www.instagram.com/privatnamarka?igsh=MWt0NzNxbHJrbXh4ZQ==\
    https://www.facebook.com/Privatnamarka
    https://youtube.com/@privatnamarkacom?si=P5RH_spetEP3x_RQ\